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Creating Novel Wx Alleles with Fine-tuned Amylose Levels and Improved Grain Quality in Rice by Promoter Editing using CRISPR/Cas9 System
CRISPR/Cas9 System Fine-tuned Amylose Grain Quality Rice
2020/4/28
In rice, the Waxy (Wx) gene encoding GBSSI (granule-bound starch synthase I) controls amylose synthesis in the endosperm and is the primary factor influencing grain eating and cooking quality (ECQ). T...
CRISPR/Cas9系统编辑水稻Wx基因
水稻 CRISPR/Cas9系统 Wx 基因编辑 直链淀粉含量
2017/5/21
【目的】直链淀粉含量与稻米品质密切相关。Wx基因是控制水稻直链淀粉合成的主效基因，通过对Wx基因定点编辑以获得稳定遗传、直链淀粉含量适宜的突变体。【方法】构建CRISPR/Cas9表达载体pGK03-Wx-gRNA (靶点1和2分别在Wx基因第1和第2外显子)，利用工程菌EHA105遗传转化超级稻楚粳27，潮霉素筛选获得转化株系，对转化株系及其后代进行分子检测、测序、基因表达和遗传稳定性分析以及直...
【目的】大麦Wx是控制直连淀粉合成相关的糯性基因,研究大麦糯性相关基因Wx单核苷酸多态性,并分析其与籽粒直链淀粉含量的关系。【方法】以2个国外糯大麦品种为对照,对30份高、中、低直链淀粉含量的中国大麦进行Wx的克隆和测序,分析Wx的单核苷酸多态性（SNP）及其与籽粒直链淀粉含量之间的关系。【结果】在对32个大麦品种的核苷酸序列多态性鉴定中,共检测到了169个多态性位点,平均每26 bp检测到一个多...
利用直链淀粉含量下降至 2 %左右的 3个转反义Wx基因糯稻为研究材料 ,较为系统地分析了转基因糯稻的遗传及其直链淀粉含量下降后对于稻米粒重的影响。结果表明由转基因技术获得的糯性性状与其它转基因性状一样 ,表现为显性遗传 ,这与一般的糯性变异不同。导入反义Wx基因使直链淀粉含量从 17%下降至糯稻水平时 ,其稻米粒重相应降低 6 %～ 8% ,且下降幅度与直链淀粉含量的下降幅度呈显著正相关。小区试...
利用Wx基因分子标记辅助选择技术培育中等直链淀粉含量的恢复系
水稻 Wx基因 直链淀粉含量 分子标记辅助选择
2009/7/20
为培育中等直链淀粉含量的水稻恢复系，以HC086为供体亲本(其Wx基因来自美国水稻品种Francis)，以优良的水稻恢复系R898、R476、R838、R6547为受体亲本，利用PCR-AccI分子标记检测技术在回交世代进行辅助选择，将供体材料控制直链淀粉的Wx基因导入到不同恢复系中。对后代株系的基因型及其直链淀粉含量的分析结果表明，直链淀粉含量普遍有了显著提高，受体亲本的直链淀粉含量由10.6-...
水稻Wx复等位基因的鉴定及单片段代换系的建立
水稻 糯性基因 单片段代换系
2008/12/26
利用微卫星标记“484/485”和“484/W2R”结合AccⅠ酶切对278份来自国内外水稻品种（系）进行了Wx座位复等位基因分析，共检测到15种等位基因，其中(CT)12-G、(CT)15-G、(CT)16-G、(CT)17-G、(CT)18-G、(CT)21-G为新发现的等位基因。以含不同Wx等位基因的20个品种（系）为供体亲本，利用回交和微卫星标记辅助选择相结合的方法，建立了72个以Wx等位...
Genetic Polymorphism of Wx Gene and Its Correlation with Main Grain Quality Characteristics in Rice
waxy gene simple sequence repeat cleaved amplified polymorphic sequence
2008/12/11
The allelic variation of the Wx gene in 50 non-glutinous rice varieties (lines) was analyzed by using the microsatellite marker RM190 [for (CT)n simple sequence repeat (SSR)] and cleaved amplified pol...
用Wx 基因的(CT)n微卫星标记和切割的扩增产物多态性序列(cleaved amplified polymorphic sequence, CAPS)分子标记PCRAcc Ⅰ 对40份同源四倍体和14份二倍体水稻Wx基因型进行研究。利用484/485引物检测，Wx基因呈 Wx1、Wx2和Wx3 3种多态性；而用PCRAcc Ⅰ检测，Wx基因表现为G型和T型。同时，在测定稻米直链淀粉含量（...
应用PCR一步法对来自云南省14个地州、55个市/县的220个籼、粳地方稻种Wx基因第一内含子供体+1位碱基G/T进行了检测，同时用PCRAcc I酶切法对其中的101份进行验证，结果表明两种方法检测结果一致。根据G/T碱基将220个供试材料分为GG、TT两种基因型。云南地方稻种以GG型占优势，有164个，占74.5%；TT型有56个，占255%；籼稻中80.5%属GG型，粳稻中67.0%属G...
水稻Wx基因的遗传多态性及其与主要米质指标的相关性分析
蜡质基因 微卫星标记 酶切扩增多态性序列标记 糊化温度 胶稠度 直链淀粉含量 水稻 多态性
2008/8/27
利用RM190和484/W2RACCⅠ标记分析了50个水稻非糯品种的Wx基因的等位性变异。其中，RM190揭示出7种(CT)n纯合变异类型和1种杂合类型，分别为 (CT)20、(CT)19、(CT)18、(CT)17、(CT)14、(CT)11、(CT)10和(CT)11/(CT)18，并以（CT）11和（CT）18两种类型为主；484/W2RACCⅠ共揭示出2种纯合类型和1 种杂合类型，分...
以转反义Wx基因粳稻和籼稻品系为材料，研究其颖果的发育和物质积累。结果表明，直链淀粉含量降低后的转基因水稻品系籽粒的粒重会有所下降，而且直链淀粉含量下降越多，粒重的下降幅度也越大。单个颖果胚乳细胞的数目也有不同程度的下降，但在籽粒发育早期（花后6 d前），转基因水稻的胚乳细胞增殖速率明显高于其亲本。直链淀粉降低后的转基因品系籽粒可溶性糖含量在发育初期（花后9 d前）低于其同时期的亲本，而花后9 d...
以60个籼稻品种（或品系）和57个（G46B/D香1B）B3F5株系为材料，通过检测Wx基因型，同时测定AC、GC和GT，探讨了水稻Wx基因与稻米AC、GC和GT的遗传关系。结果AC与GC极显著负相关，且二者均与Wx基因型密切相关，Wx基因的GG型材料具有较高的AC和较硬的GC，而TT型材料具有中等的AC和较软的GC，在全部57个B3F5代株系中AC的高低和GC的硬软与Wx基因型同步分离，表明AC...
水稻胚乳中的直链淀粉含量是影响稻米蒸煮和食味品质的重要性状。试验了适合水稻冈46B和Ⅱ-32B品种进行遗传转化的外植体、培养基及光温条件，采用遗传转化技术将反义Wx基因导入生产上大面积应用的籼稻保持系冈46B和Ⅱ-32B，获得了转基因植株。PCR检测证明外源基因已整合进水稻的基因组。分析结果表明，纯合转基因水稻植株成熟种子直链淀粉含量发生了不同程度的变异。
小麦Wx基因突变体的建立及其淀粉特性的研究
Wx基因 重组自交系 淀粉特性 小麦
2007/11/14
以小麦品种藁城8901为母本，糯麦1号为父本，用“单粒传”法构建了一个含有8种Wx基因突变类型的重组自交系群体 (RIL) 。应用改良的SDS-PAGE方法对RIL-7的Wx基因突变类型进行检测，发现在228个株系中，正常类型的株系有34个，Wx-A1突变体为26个，Wx-B1突变体为32个，Wx-D1突变体30个，Wx-A1和Wx-B1位点同时突变的有28个，Wx-A1和Wx-D1位点同时突变的...