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2021年3月23日,山东省农业科学院畜牧兽医研究所黄金明研究团队在《Genomics》(IF=6.205)上在线发表题为“Introgression, admixture, and selection facilitate genetic adaptation to high-altitude environments in cattle”的研究论文。
鸡Apob基因组织表达与CRISPR/Cas9敲除系统的构建
鸡 Apob基因 CRISPR/Cas9 脂质代谢
2020/7/24
旨在探究Apob基因在鸡肝脂质代谢过程中的功能。本研究对鸡Apob蛋白进行理化性质分析;利用RT-qPCR检测Apob基因在4周龄黄羽肉鸡组织中的表达情况,每组设置3个重复,进行3次平行试验。根据鸡Apob蛋白关键结构域,在Apob基因外显子设计3对sgRNA,构建Cas/gRNA载体;将重组质粒转染DF-1细胞后,利用T7核酸内切酶I (T7 endonuclease I,T7EI)酶切法和TA...
旨在系统鉴定猪基因组中的环状RNAs(circular RNAs,circRNAs),并对其分子特征进行分析。本研究采集长白、通城和五指山猪16个发育阶段(妊娠33、40、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100和105 d的胚胎以及出生后0和10 d)9种不同组织(背最长肌、心、脾、肺、肝、肾、胃、小肠和腿肌)样品,提取RNA再进行等量混合,构建链特异性转录组文库后,利...
光色、光照时间、光照强度都会对鸡的生长、发育、产蛋量以及一些啄趾、啄羽、啄肛等动物行为产生重要的影响。不恰当的光照会影响鸡的正常生长速度、性成熟周期、产蛋量,给养殖场带来巨大的经济损失。然而,现阶段鸡舍里面大多安装的是普通的白炽灯。LED灯作为第四代光源,具有节能环保、使用寿命较长以及冷光性等特点,且它能够实现不同颜色的LED灯交叉配比,易于被智能化控制,发展前景被国内外科学研究人员普遍看好。
国家兽药追溯系统是通过在兽药产品包装上印制唯一性标识——二维标识码,生产者、经营者、监管者和消费者都可扫描二维标识码识读标签内容,查询兽药产品相关信息,实现兽药产品可追溯。国家兽药追溯系统平台包含国家兽药基础信息查询系统、国家兽药产品追溯信息系统、印制二维码标签、采集二维码数据、兽药追溯的系统集成与数据应用。
PmrA-PmrB二元调控系统介导大肠杆菌对黏杆菌素耐药的机制研究
黏杆菌素耐药 大肠杆菌 pmrA-pmrB 突变
2015/11/9
已报道PmrA-PmrB二元调控系统在革兰阴性菌对多黏菌素B耐药过程中起重要作用,基于此认识,作者拟从基因突变和mRNA表达两个方面探讨PmrA-PmrB介导大肠杆菌对黏杆菌素耐药的可能性。首先检测了临床分离的52株禽致病性大肠杆菌对黏杆菌素的敏感性,筛选出耐药菌株;然后采用step-wise方法对黏杆菌素敏感菌株进行诱导,获得人工诱导的耐药菌株;最后通过PCR扩增所有耐药菌株的pmrA-pmrB...
旨在利用CRISPR/Cas 9新型基因编辑技术构建大肠杆菌aroA基因的敲除系统,并分析其对不同大肠杆菌aroA基因敲除、修复的差异。首先构建靶向aroA基因的CRISPR/Cas 9载体;随后人工设计同源修复供体基因序列,并亚克隆到CRISPR/Cas 9载体中,构建成完整的CRISPR/Cas 9基因敲除体系;将该系统分别应用到大肠杆菌DH10B、DH5α和JM109细胞中,PCR鉴定筛选到...
phoP/Q作为一种外在环境感受器,参与调节细菌对外部环境的适应性。本研究拟探讨phoP/Q双组分系统对禽致病性大肠杆菌(APEC)的生长、定植、毒力等生物学特性的影响。利用Red重组系统构建APEC AE 17株的phoP/Q双组分调控系统缺失株,并构建phoP/Q双组分调控系统回复质粒,转化缺失株,构建回复株。通过生长运动性试验、黏附入侵CEF细胞试验、毒力基因转录水平检测以及半数致死量(LD...
SG97A平衡致死系统的构建及其初步应用
鸡伤寒沙门菌 asd基因 宿主载体平衡致死系统 NDV-F蛋白
2015/4/13
敲除鸡伤寒沙门菌(SG)减毒疫苗株97A asd基因,构建宿主载体平衡致死系统并表达新城疫病毒(NDV)F蛋白,构建二价活菌苗。PCR扩增两段位于asd基因外侧的序列作为等位基因,以氯霉素抗性(CmR)基因替代asd基因,构建自杀质粒pGMB151Δasd::CmR,通过E.coli χ7213与SG97A固相杂交,将质粒转入SG97A,反向筛选获得SG97AΔasd::CmR,利用质粒pCP20...
为了今后能够有效的利用CRISPR-Cas9系统进行基因功能研究及转基因动物的培育,本研究将带有绿色荧光蛋白(GFP)和肌肉生长抑制素基因(Myostatin,MSTN)靶序列的CRISPR-Cas9系统转染入PK15细胞系,利用流式细胞仪分离并收集转染成功的阳性细胞,使用PCR扩增结合克隆测序的方法检测和分析CRISPR-Cas9系统的定点突变情况,以评价CRISPR-Cas9系统的作用效果。结...
山羊y+L碱性氨基酸转运系统转录水平表达的研究
山羊 y+L碱性氨基酸转运系统 实时荧光定量PCR mRNA表达
2014/10/30
旨在研究山羊y+L碱性氨基酸转运系统中4F2hc、y+LAT1和y+LAT2 mRNA表达的组织特异性及其在不同年龄山羊小肠中的发育性表达规律。试验选取健康、体重相近的1日龄、6月龄、8月龄、10月龄、12月龄陕北白绒山羊各3只,共15只,屠宰后采集心、肝、肾、大脑、背最长肌、体侧皮肤、瘤胃、十二指肠、空肠、回肠和结肠组织,利用实时荧光定量PCR技术检测4F2hc、y+LAT1和y+LAT2 mR...
邱强,男,1982年5月出生,博士,副研究员。主要研究方向为高原唯一大型家畜-牦牛适应高原极端环境的遗传学机制,以及牦牛群体基因组学和重要经济性状基因的鉴定。主持自然科学基金青年基金和科技部-国家高技术研究发展计划(863计划)子课题各一项。在Nature Genetics、BMC Genomics、Tree Physiology等期刊发表SCI论文7篇,被Annual Reviews, Natu...
由规律成簇间隔短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)以及CRISPR相关蛋白9(CRISPR-associated protein 9,Cas9),即CRISPR/Cas9系统改造的第3代人工核酸内切酶,与锌指核酸内切酶(Zinc finger endonuclease,ZFN)以及类转录激...